Методы исследования микроорганизмов, обитающих на поверхности корней

глаза и зрение
Комментариев к записи Методы исследования микроорганизмов, обитающих на поверхности корней нет

Существуют различные методы культивирования микроорганиз­мов, живущих в контакте с поверхностью корней (микроорганиз­мов ризопланы). Общим для всех методов является прежде всего удаление с корней почвы и затем отделение с их поверх­ности микроорганизмов.
Культивирование микроорганизмов ризопланы методом Бере­зовой. Корневую систему растения извлекают из почвы, в сосу­де с водопроводной водой размачивают прилипшие к корням частицы почвы, еще 2—3 раза переносят в сосуды с чистой водо­проводной водой, а затем несколько раз промывают в стериль­ной воде. Очищенные таким образом корни измельчают стери­лизованными спиртовым факелом пинцетом и ножницами и по­мещают в стерильную чашку Петри. На стерилизованном горя­щим спиртом часовом стекле взвешивают 5 г корней, растирают их в стерильной фарфоровой ступке и, соблюдая стериль­ность, смывают водой в колбу емкостью 200 мл с таким расче­том, чтобы объем суспензии составил 50 мл. Суспензию встряхи­вают в течение пяти минут. Если в воду внести 5 г кварцевого песка, микроорганизмы легче отделяются от поверхности корней. Затем 5 мл жидкости переносят в другую колбу, содержащую 45 мл стерильной воды. Повторив эту процедуру несколько раз, получают серию 6—7 разведений, которые высевают на поверх­ность или в толщу агаровой питательной среды. Для первого посева берут 0,1 мл суспензии, для последнего — 1 мл.
После инкубации подсчитывают колонии бактерий, актиноми­цетов и грибов. Для количественного определения ризосферных бактерий используют питательный агар (123), число актиноми­цетов определяют на казеино-глюкозном агаре (94), а грибов — на питательной среде Мартина (116). Содержание микроорга – низмов пересчитывают на 1 г абсолютно сухих корней.
При выкапывании растения значительная часть корней оста­ется в почве. Если для исследования необходима вся корневая система, растения выращивают в специальных сосудах, из ко­торых можно извлечь корни полностью. Для этой цели Березо – ва [9] рекомендует применять прямоугольные пластмассовые со­суды сечением  мм и высотой 180 мм, одну из сторон которых образует съемная стеклянная пластина; сосуд заполня­ют почвой или кварцевым песком. Семена растений высевают непосредственно у стекла, чтобы можно было наблюдать за развитием корней. После инкубации стекло удаляют, и растение извлекают вместе со всей почвой, которую затем смывают. Даль­нейший ход исследования остается неизменным, т. е. корни рас­тирают, готовят серию разведений корневой суспензии и опреде­ляют число колоний, выросших на питательных средах.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

AMedicalz.ru